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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
YAC-1細胞，瘤細胞 人結腸腺癌細胞,HT-29細胞 CM-H021人前列腺平滑肌細胞*培養基100mL甾醇；(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Ergosterol

大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1甾醇(90%)質量規格：>90%,BRErgosterol

GFRA1 Others Mouse 小鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 蔓荊子黃素（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Vitexicarpin

雪旺氏細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芒果苷(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Mangiferin

ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) 嗎替麥考酚酯-d4質量規格：美國進口Mycophenolate Mofetil-d4
PRKD3 Others Human 人 PKC nu / PRKD3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 地塞米1酸鈉（標準品）Dexamethasone  Phosphate質量規格：HPLC>98%,標準品

小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH3D-蛋氨酸D-Mine質量規格：>98%,BR

RSC96細胞，大鼠雪旺細胞 人肝癌細胞,9204細胞 CL-0136L6(大鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2索非布韋Sofosbuvir (GS-7977)質量規格：>99%,BR

中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]D-鳥氨酸鹽酸鹽D-Ornithine mono質量規格：>98%,BR

ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) D-苯丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽H-D-Phe-OtBu.HCI質量規格：0.98
ECM1 Others Mouse 小鼠 ECM1 人細胞裂解液 (陽性對照) L-α-基-β-羥基，英文名或英文縮寫：L-Threonine，級別：BR，99%，規格：10克

人色素瘤細胞;A875BOC-L-天門冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通用試劑

IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 流醋亞鐵銨;馬爾氏鹽;低鐵礬;亞鐵銨礬;流醋低鐵銨;六水合流醋亞鐵銨;流醋亞鐵銨;六水合流醋鐵銨;六水合流醋鐵(Ⅱ)銨 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9

人肝竇內皮細胞*培養基 100mL5′-CTP，4Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸四鈉鹽溶液5UUSP級，98%

LLC細胞，小鼠肺癌細胞 CHO(中國倉鼠卵巢細胞) 恒河猴肺細胞;RM-L1姆沙伯 P AW DMCSChromosorb P AW-DMCS
p53 Phospho-Thr18 Antibody2. 皮膚細胞系統三糖Melezitose hydrate質量規格：>98%,進分

U251人膠質瘤細胞聚乙二醇20000PEG 20000質量規格：BR

人結直腸腺癌細胞;COLO 205 大鼠腎動脈平滑肌細胞*培養基 100mL2-氨基噻唑(>98%，BR)2-Aminothiazole質量規格：>98%，BR

MLA144 MLA144長臂猿瘤細胞氯化鈰七水Cerium (III) chloride, heptahydrate質量規格：>99.9%

CHI3L2 Others Human 人 CHI3L2 / YKL-39 人細胞裂解液 (陽性對照) D-阿拉伯糖醇(標準品)D(+)-Arabitol質量規格：分析標準品
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。